piątek, 29 marca 2013

GFP - białko zielonej fluorescencji


GFP (ang. green fluorescent protein)
  • Białko małe: 238 aminokwasów, 26,9 kDa
  • Naturalnie występujące
  • Wyizolowane z meduzy Aequeorea wictoria, występującej na zachodnich wybrzeżach Ameryki Północnej (1962 O. Shimomure, dalsze prace Chalfie)
  • Wykorzystywane jako znacznik, ponieważ może wiązać się z innymi niewidocznymi białkami (pierwsze testy na C. elegans)
  • Tzw. cząsteczka reporterowa. Znakowanie przez GFP umożliwia obserwacje umiejscowienia, przeniesienia i działania znakowanych białek
  • Narzędzie inżynierii genetycznej i biologii molekularnej
  • Dołączone do innego białka, stworzeniu fuzji, pozwala śledzić losy badanej cząsteczki w komórce dzięki świeceniu, któe pozwala na lokalizację podczas obserwacji mikroskopowych
  • GFP emituje zielone, a pochłania niebieskie światło i UV
  • Świeci pod wpływem UV
  • Śledzenie jego obecności nie wymaga enzymów, wzbudzanie świecenia zachodzi spontanicznie.
  • W oparciu o strukturę GFP, stworzono liczne warianty  kolorystyczne:  żółto (ang. yellow, YFP), czerwono (ang. red, RFP), niebiesko (ang. blue, BFP), cyjanowo (ang. cyan, CFP) przy zmianie długości fali emitowanego światła. W wyniku przeprowadzenia mutacji oraz modyfikacji strukturalnych udało się otrzymać białka o lepszej wydajności tzn. silniejszej fluorescencji. W ten sposób powstały: białko wzmocnionej zielonej fluorescencji EGFP (ang. enhanced green fluorescent protein) i analogiczne: EYFP, EBFP oraz ECFP. Dzięki takim modyfikacjom możliwe jest znakowanie różnych elementów jednocześnie
  • Co ważne białka fluorescencyjne zachowują neutralność w stosunku do komórki, a więc są nietoksyczne
  • W 2008 roku przyznano Nagrodę Nobla chemikom: Martinowi ChalfiemuOsamu Shimomurze i Rogerowi Tsienowi, za odkrycie i badania nad GFP


Brak komentarzy:

Prześlij komentarz

Zapraszamy do komentowania, każdą uwagą warto się podzielić

Related Posts Plugin for WordPress, Blogger...