wtorek, 16 lipca 2013

Techniki chromatograficzne


Techniki chromatograficzne
  • Technika Powinowactwa:

1) Kowalencyjne przyłączenie gr X (np. glukoza)
2) Nałożenie mieszaniny białek na kolumnę
3) Przemycie buforem (usuwa białka niezwiązane)
4) Elucja białek związanych


Przykład: Konkanawalina - białko roślinne wiąże się z glukozą (w większości inne proteiny nie wykazują powinowactwa do glukozy i przepływają przez kolumnę)

Konkanawalina uwalniana jest z kolumny przemyciem jej stężonym roztworem glukozy.
  • Technika Jonowymienna

wykorzystuje powinowactwo białek wobec złoża (jego wypadkowy ładunek elektryczny jest inny dla każdego białka).

Kolumny:
Dodatnio naładowane złoże (DEAE-celuloza) wyłapuje białka obdarzone „-„
Ujemnie naładowane złoże (CM-celuloza) wyłapuje białka „+”

  • Filtracja żelowa 

kolumny z Sephadex, Sepharose. Małe białka wnikają do środka ziaren złoża i zatrzymują się na kolumnie, natomiast duże proteiny przepływają.

Brak komentarzy:

Prześlij komentarz

Zapraszamy do komentowania, każdą uwagą warto się podzielić

Related Posts Plugin for WordPress, Blogger...